HMC3细胞系,是通过人胎脑源性原代小胶质细胞培养物的 SV40 依赖性永生化建立的,静息 HMC3 细胞的小胶质细胞/巨噬细胞标志物IBA1呈强阳性,星形胶质细胞标志物GFAP呈阴性。
悬浮细胞培养活化小胶质细胞的标志物,即MHCII、CD68 和 CD11b,在静息 HMC3 细胞中呈阴性,但在被 IFN-γ(10ng/mL,24 小时)激活后上调。
具体应用

神经科学,神经炎症
转化的人小胶质细胞代表可以无限生长的同质细胞群,并且可以用于小胶质细胞功能的生化分析的便捷系统。正如实验所证明的,它们还可以进行转染,这对研究小胶质细胞中各种转染基因的表达调控有重要意义。
培养注意事项
1 2-3天换液一次;
2 培养过程中可能会有细胞碎片产生,及时换液除去即可。
传代步骤
1 吸出原培养液;
2 加入2mL左右PBS,轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃;
3 加入1mL左右胰酶,轻轻晃动培养瓶,使之浸润所有细胞;
4 放入培养箱消化,消化2-3分钟,轻拍培养瓶侧壁,显微镜下看到细胞脱壁且聚集的细胞团松散开后,可终止;
5 加入3mL含血清的培养基,终止消化,吹打细胞使之脱壁,并在液体里反复吹打,使细胞混匀为悬浮液,这时可以在显微镜观察;
6 收集细胞悬液离心,1200rpm/min 3分钟,离心完吸出上清丢弃;
7 加入新鲜培养基,吹打几下混匀细胞即可;按需接种到新培养瓶,补足培养基,拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养;
8 检查培养箱二氧化碳、温度和水盘。
悬浮细胞培养活化小胶质细胞的标志物,即MHCII、CD68 和 CD11b,在静息 HMC3 细胞中呈阴性,但在被 IFN-γ(10ng/mL,24 小时)激活后上调。
具体应用

神经科学,神经炎症
转化的人小胶质细胞代表可以无限生长的同质细胞群,并且可以用于小胶质细胞功能的生化分析的便捷系统。正如实验所证明的,它们还可以进行转染,这对研究小胶质细胞中各种转染基因的表达调控有重要意义。
培养注意事项
1 2-3天换液一次;
2 培养过程中可能会有细胞碎片产生,及时换液除去即可。
传代步骤
1 吸出原培养液;
2 加入2mL左右PBS,轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃;
3 加入1mL左右胰酶,轻轻晃动培养瓶,使之浸润所有细胞;
4 放入培养箱消化,消化2-3分钟,轻拍培养瓶侧壁,显微镜下看到细胞脱壁且聚集的细胞团松散开后,可终止;
5 加入3mL含血清的培养基,终止消化,吹打细胞使之脱壁,并在液体里反复吹打,使细胞混匀为悬浮液,这时可以在显微镜观察;
6 收集细胞悬液离心,1200rpm/min 3分钟,离心完吸出上清丢弃;
7 加入新鲜培养基,吹打几下混匀细胞即可;按需接种到新培养瓶,补足培养基,拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养;
8 检查培养箱二氧化碳、温度和水盘。
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