人类免疫缺陷病毒HIV感染导致艾滋病AIDS目前还没有疫苗可以预防,也没有治愈这种疾病的有效药物或方法。目前,艾滋病仍是威胁我国公众健康的重要公共卫生问题。
印迹法截止至2018年年底,中国存活艾滋病感染者约125万,其中近30%对自身患病不知情。2018年新发记录感染64170人,死亡18780人。联合国艾滋病规划署提出在2020年实现90%感染者通过检测知晓感染状况。由2018年的卫健委统计数据显示,我国还有30%,近40W感染者不知其感染状况,任务十分艰巨,市场也很巨大。今天小编带大家了解下HIV诊断技术、生产企业及产品。

免疫层析法
近几年国外兴起的一种快速诊断技术,其原理是将特异的抗体先固定于硝酸纤维素膜的某一区带,当该干燥的硝酸纤维素一端浸入样品(尿液或血清)后,由于毛细管作用,样品将沿着该膜向前移动,当移动至固定有抗体的区域时,样品中相应的抗原即与该抗体发生特异性结合,若用免疫胶体金或免疫酶染色可使该区域显示一定的颜色,从而实现特异性的免疫诊断。
目前市面上使用较多的快检平台主要是免疫层析法(LFA),即试纸条。试纸条是目前应用很广的快速检测平台。广泛应用于孕检、HIV等的快速诊断。其示意图如下所示:
试纸条的制备非常简单,检测时间也很快,是目前HIV筛查最常用的方法。但该法容易出现假阳性或者漏检。目前最新的方法是采用荧光物质等进行信号标记,使用便携式的荧光阅读仪实现半定量或者定量检测。
Western 印记(蛋白印迹法)
将获得的蛋白质样品通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,对不同分子量的蛋白质进行分离,然后通过转移电泳将凝胶上分离到的蛋白质转印到固相支持物上。免疫印迹法是确认HIV感染的金标准,其具有很高的特异性。严格来说所有的HIV感染确认都应该做这个实验。原理如图所示:
反转录PCR(RT-PCR)
又称为逆转录PCR,提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作为模板,采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增,而获得目的基因或检测基因表达。
印迹法截止至2018年年底,中国存活艾滋病感染者约125万,其中近30%对自身患病不知情。2018年新发记录感染64170人,死亡18780人。联合国艾滋病规划署提出在2020年实现90%感染者通过检测知晓感染状况。由2018年的卫健委统计数据显示,我国还有30%,近40W感染者不知其感染状况,任务十分艰巨,市场也很巨大。今天小编带大家了解下HIV诊断技术、生产企业及产品。
免疫层析法
近几年国外兴起的一种快速诊断技术,其原理是将特异的抗体先固定于硝酸纤维素膜的某一区带,当该干燥的硝酸纤维素一端浸入样品(尿液或血清)后,由于毛细管作用,样品将沿着该膜向前移动,当移动至固定有抗体的区域时,样品中相应的抗原即与该抗体发生特异性结合,若用免疫胶体金或免疫酶染色可使该区域显示一定的颜色,从而实现特异性的免疫诊断。
目前市面上使用较多的快检平台主要是免疫层析法(LFA),即试纸条。试纸条是目前应用很广的快速检测平台。广泛应用于孕检、HIV等的快速诊断。其示意图如下所示:
试纸条的制备非常简单,检测时间也很快,是目前HIV筛查最常用的方法。但该法容易出现假阳性或者漏检。目前最新的方法是采用荧光物质等进行信号标记,使用便携式的荧光阅读仪实现半定量或者定量检测。
Western 印记(蛋白印迹法)
将获得的蛋白质样品通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,对不同分子量的蛋白质进行分离,然后通过转移电泳将凝胶上分离到的蛋白质转印到固相支持物上。免疫印迹法是确认HIV感染的金标准,其具有很高的特异性。严格来说所有的HIV感染确认都应该做这个实验。原理如图所示:
反转录PCR(RT-PCR)
又称为逆转录PCR,提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作为模板,采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增,而获得目的基因或检测基因表达。
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