(2)组织培养外植体的选择。以初生茎的顶芽和侧芽为外植体。不同品种启动难度不同。陆生兰一般为16%-75%:夏兰一般比春兰容易;文心兰很难诱导。气兰中的青蝉和红蝉更容易成功。材料的消毒、切割和接种,从母株上切下初生茎后,用自来水冲洗,剥去外叶,吸收表面水分,用75%酒精浸泡几秒钟,用饱和漂白粉上清液浸泡10分钟,用无菌水冲洗三次,然后放在无菌滤纸上吸收水分,用手术刀取芽接种。培养基和培养方法,不同品种需要不同的培养基,夏兰、秋苏等大花蕙兰品种应使用无机盐浓度较高的MS培养基。一般使用0.5-5ppm的激动剂,培养基的酸碱度为5.2-5.5,培养室的温度为25±3℃。接种初期,外植体开始形成原球茎,然后移入光培养室。本土兰花的大多数原球茎都是丛生的,或者叫做根茎。气兰是球形的。成分相同的固体介质和液体介质应交替使用。每30天更换一次固体培养基。原球茎可以不断分裂增殖。将原球茎转移到添加适量6-BA和NAA的B5固体培养基中,芽和根可以分化,分化率达到95%。1-2个月后,苗高2-3 cm,有1-2根时,转移到不含6-BA的培养基中,使其健康生长。每1-2个月更换一次培养基。4-6个月后,苗高10-12厘米,有2-3根。当根芽生长旺盛时,从接种到移植大约需要1.5-2年。试管苗的移植和养护;移植前将试管拿到移植苗圃,揭开放置三四天,现在逐渐适应新环境。取出试管苗,用自来水仔细冲洗琼脂。培养土应为含少量木炭的泥炭土,也可加入已灭菌的烂叶中。每盆种5-10株,浇水。移栽苗应放置在弱光条件下,湿度为80%,温度为15-25℃,空气清洁循环。存活后移至光线正常、温湿度适宜、通风的环境。移植成活率85%-90%。
(3)虽然一个兰花果实中有多达10万甚至100万个种子,但种皮不容易吸水,所以常规方法播种时不能发芽,需要用兰花菌或人工培养基补充营养,播种后才能发芽。播种时,最好选择尚未开裂的果实,表面用75%酒精消毒,在无菌条件下用刀切开,取出种子,用细白布包裹,放入烧杯中。用10%次氯酸钠浸泡5-10分钟,或用饱和漂白粉清液充分浸泡20分钟,用无菌水冲洗3次,播种于培养基上。播种后,培养室温度保持在25±13℃。萌发后最初以白色小颗粒出现,后迅速膨胀,移至光照下变成绿色,形成原球茎。气兰的原球茎是球形的。本地兰花大多是丛生的,将来生长迅速。从播种到移栽需要六个月到一年。
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