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春兰家族的组织培养和快速繁殖

20世纪70年代以来,科研院所已在兰科植物中采用生物工程技术繁殖兰花,其效果是传统方法无法媲美的。笔者尝试在家庭环境里开展此项工作,已获得小批量的春兰试管苗。现将具体做法介绍如下,供兰友们参考。

【/h/】①建立小型家庭组织培养室,自制设备,推出简单的土法。众所周知,这项工作应该在无菌条件下进行。因此,有必要开发密封良好的玻璃接种箱和空气净化装置,并采取各种技术措施降低旋转瓶的污染率。酒精喷尘成功率提高到92%,为选择最佳培养基配方赢得了时间,奠定了良好的基础。

(2)无菌操作在家庭环境中如何实现?作者着重于以下几个方面:

所有与培养基接触且能耐高温的器皿均采用干热法(140 ~ 150℃)处理,不能耐高温的器皿采用化学法灭菌。

为了解决接种要在火焰上进行的问题(因为箱内几乎没有空气),增加了30瓦的电炉,但因为温度高容易烧坏外植体,所以增加了通风降温设施。

为了减少刀具在循环中的二次污染,将刀具放入高温中毒后一端封闭的圆柱体中,不断吹入净化空气进行冷却,以保证外植体安全无损地进入营养基瓶。

所有进入盒子的物品在放入之前必须用酒精消毒。箱子里不允许有携带者。箱体的消毒程序是酒精喷洒后紫外线消毒,定期用甲醛和高锰酸钾熏蒸……③选择合适的介质。MS加萘乙酸和细胞分裂素诱导初生分化和初生根。但是成分需要在不同的生长阶段进行调整,尤其是生根时,因为兰花比其他品种的花更难生根,所以在NAA高浓度浸泡几秒钟的方法效果很好。

④离群点的采纳和消毒。长根(无展叶)苗为最佳外植体,成活率较高(最佳接种季节为10月至次年2月)。对于外植体消毒,笔者多次采用0.1升汞加0.1%浓盐酸的方法,效果较好。

⑤培养环境。光照1000 ~ 2000 le,10 ~ 16小时,培养湿度26℃土壤2℃,空气湿度应控制在较低水平(70% ~ 80%),否则容易再次污染。

一些经验:

(1)投资少(充分利用国内条件)在国内建立小规模组织培养是可行的。作者从准备到实验只花了几百元,实验设备也可以用来对其他品种(如木本植物、药用植物等)进行研究工作。).

②无菌操作必须在思想上引起重视,谨慎从事。否则后果不堪设想。

(3)目前因为手头没有固体显微镜,只能做带芽发芽的实验。采取分阶段切样、旋转床加液等措施,是获得大量类原球茎的途径,其繁殖速度也会有所突破。

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