快速大量繁殖:广泛用于一些难以繁殖的珍稀花卉品种和一些短时间内急需生产的花卉。兰花、菊花、唐菖蒲等花卉通过腋芽增殖,在短时间内获得大量植株。非洲紫罗兰可以通过水仙的叶子和鳞片诱导不定芽来大量繁殖。
花卉育种:百合、鸢尾等多种花卉可通过远缘杂交进行杂交。由于生理代谢等原因,杂种胚胎往往在早期就流产,无法获得杂种植株。而试管胚胎培养可以使其顺利生长,获得远缘杂种。此外,花卉育种可以采用愈伤组织诱导、花粉培养等多种方法。
在培育无病毒苗的过程中,菊花、剑兰、水仙、郁金香、大丽花等大量花卉通过无性繁殖进行繁殖,病毒一代一代地传播和积累,危害越来越大。而脱毒种苗基本上是通过分离大小为0.1-0.5 mm的花卉植物的生长点获得的,因此这一技术在花卉的脱毒种苗培育中得到了广泛的应用。
2.花卉组织培养对实验室和设备的要求
花卉组织培养是在人工控制的条件下培育花卉,是现代工厂化生产花卉的新技术,因此对实验室和设备有一定的要求。
在实验室方面
①化学实验室:主要负责培养基的配制。要求有各种化学试剂,各种玻璃器皿,衡器等。
②清洗室:主要用于清洗玻璃器皿,清洗后需要一个自来水装置和烘箱烘干。
③灭菌室:主要用于培养基和器皿的灭菌。应有带水源和电源的高压釜。
④接种室:是花料分离、消毒、接种、转移的场所。密封,干净整洁,配有紫外线灯,可随时消毒。有的也可以换成接种箱或洁净工作台。
⑤栽培室:花卉材料栽培生长的地方。要求干净、保温性好、室温均匀、隔热防火。
设备方面
①天平:用于配制培养基时称量药物和激素。普通秤用于大型元件;微量元素和激素的分析天平。
②酸度计:用于测量培养基的酸碱度。
③高压灭菌器:用于培养基和仪器的灭菌。
④烘箱:用于清洗后的玻璃器皿的干燥和灭菌。
⑤蒸馏水生产装置:获取纯净水进行培养。
⑥冰箱:用于储存母液和植物原料。
⑦接种箱或洁净工作台:接种或转移植物材料的操作场所。
⑧空调:用于控制室温。
3.花卉组织培养对培养基的要求
培养基是花卉植物组织培养中非常重要的基质,目前有多种应用,但其主要成分几乎相同,主要成分是水,还有其他主要元素、微量元素、维生素、生长调节物质、蔗糖和琼脂等。
目前,MS培养基广泛应用于花卉组织培养。它由加入硝酸铵1.65克、硝酸钾1.9克、氯化钙0.44克、硫酸镁0.37克、磷酸二氢钾0.17克、碘化钾0.83毫克、硼酸5.2毫克、硫酸镁22.3毫克、硫酸锌3.6毫克、钼酸钠0.25毫克、硫酸铜0.025毫克组成。其他生长调节物质应根据花卉种类和栽培目的确定。MS培养基中常量元素浓度过高,经常用1/2和1/4常量元素培养,生长效果好。
配制培养基前,准备好三角瓶、试管、烧杯、量筒、吸盘等玻璃器皿,提前称好药。先将琼脂溶解,再加入各种营养元素和蔗糖,深度溶于水,然后用氢氧化钠或盐酸调节培养基的pH,一般控制在5.7左右。之后可以单独注入繁殖瓶,加盖。培养基应通过高压灭菌进行灭菌。冷却后,放入培养室预培养3天,只有在没有杂菌污染的情况下,才能接种花料。
4.花卉组织培养的过程
花卉的组织培养称为无菌培养,即待培养的材料不含杂菌。从大田或温室中扦插花材时,应选择健壮、无病的母株,取嫩而结实的分生组织部位进行生长。
虽然取的材料都是精选的,但是外面总是有很多杂菌。因此,接种前应进行表面消毒。一般用自来水冲洗十分钟,刷掉泥巴。洗涤后,用70%酒精浸泡10-15秒进行消毒。然后用无菌水(蒸压蒸馏水)冲洗两次,用10%漂白粉清液浸泡20分钟消毒,最后用无菌水冲洗3-4次。一些洗衣粉可以添加到不易弄湿和消毒的有绒毛的材料中。以上操作应在无菌环境下进行,如接种箱或洁净工作台。表面灭菌后,用无菌滤纸吸水。然后用手术刀把需要的部位切开,一般几毫米大小,脱毒苗要在1毫米以内,然后用手术刀或者枪镊子把材料接种到培养瓶中培养。工具用完时,用95%酒精浸泡,或用火焰消毒,避免工具内细菌造成交叉污染。操作时,穿工作服,戴工作帽,提前洗手,然后用酒精棉擦拭,再试一次。
5.花卉组织培养材料的培养和移植
将花料接种后放入培养室培养。栽培室是栽培花卉材料的地方,一般占地几至十平方米。高度2米左右,空间小,可以节省控温的能源。培养材料放在培养架上培养。培养架可以用木材或金属制成,有4-5层,每层高40-50厘米,顶部安装荧光灯。架子长约1.2米,与40瓦荧光灯长度一致,宽80-90厘米。每层可以安装两个荧光灯,这样培养时的照度约为3000勒克斯。培养室内大部分温度昼夜恒温保持在25℃±2℃,也有部分昼夜变温,夜间温度可以更低,这要根据花卉生长的需要来确定。日光灯照明,每天12-16小时。
花卉试管苗由于人工提供的优越条件,一般生长良好,根多,但往往不能掌握其特性,导致移栽成活率低。这是因为试管苗是在瓶内高湿度条件下培养的,人工提供蔗糖等碳源。花材共同生活在异养状态,可以说比温室里生长的花精致多了。但是突然从瓶子里移到土壤里过自养生活,往往会因为剧烈的变化而造成损害甚至死亡。因此,当花卉试管苗开始取出时,仍应盖上玻璃瓶,或盖上薄膜袋(有几个小孔),一周后取出。喷雾条件更理想。一开始遮荫7-10天,然后逐渐见阳光。沙和蛭石是最好的移栽基质,要排水通风良好,营养液隔天浇一次。循序渐进的锻炼适应环境。2-3周后,驯化后的幼苗可以移至培养土中种植。
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