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络石藤花叶的组织培养和快速繁殖技术

1、花叶络石简介

1.1植物名Trachelospermurnjasmlnoidesf1ame。络石藤,又名石龙藤,是夹竹桃科常绿藤本植物,有气生根,常攀援于树木、岩石、墙壁上;五月初夏百花盛开,形似“万”,芳香四溢。花叶络石,叶片上有白色或乳白色斑点,呈红色。茎有不明显的皮孔,小枝、叶和嫩叶柄被短柔毛,老枝和叶无毛。叶片革质,卵圆形,圆形或宽圆形,倒置,长2-6厘米,宽1-3厘米。老叶近绿色或淡绿色,第一轮新叶为红色,每枝多为一对,少数为2-3对粉红色叶,第二至第三对为纯白叶,纯白叶与老绿叶之间有几对马赛克,叶脉多为白色,叶片上有不规则的白色斑块,白色成分由新叶向老叶逐渐减少。

1.2养殖范围络石藤自然分布于中国东南部和黄河以南。根据对浙江省金华、萧山两地大田种植和盆栽试验的初步分析,可在原品种内进行彩叶地被植物和景观选择植物的大田栽培。作为室内盆栽观赏植物,可用于任何地区,尤其是光照条件较好的地区。

1.3观赏价值与园林应用马赛克络石藤的观赏价值在于它的三级叶色,由红、粉、纯白、白、绿叶组成,非常像一束盛开的花,极其艳丽多彩。因为它属于新叶的颜色,而不是图案和颜色,所以它的观赏期是一年四季,尤其是春夏秋冬。相对来说,因为冬天没有新叶,观赏效果更差。为了达到最佳的颜色效果,需要进行强度修剪,以促进枝条发芽,形成紧密的植物簇,并促进新叶的生长。在园林中,是一种极其美丽的地被植物,可作为多年生“开花”植物进行各种花径安排;同时是一种优良的盆栽材料,可以替代目前公园和现代设施中的盆栽风景,以克服经常更换盆花的观赏期短、成本高的缺点。此外,它也是一种优秀的植物,可以作为家庭盆栽植物。1.4花叶络石的引种成活率高达65%。发现花叶络石藤在一年中的任何季节都可以扦插繁殖,春秋两季生根率可达80%以上。夏季扦插对于一些长得太嫩的枝条容易腐烂,但达到半木质化的枝条可以生根成活。但经过无性繁殖多代育种,容易出现叶色退化、苗色不稳定;通过组织培养繁殖花叶络石的技术,在组织培养过程中可出现花叶,遗传性状稳定。

2材料类:当年新芽。

3.基本培养基是HS。(1)诱导休眠芽萌发的培养基MS+NAA0.05mg/L-1(下同)+6-ba 2.0;(2)芽增殖培养基:ms+IAA 0.2+6-ba 1.5;(3):育苗基质:MS+NAA 0.5+6-BA 0.5;生根培养基:1/2ms+NAA 0.5+IBA 0.2。向上述培养基中加入20g/L-1蔗糖和7g -1琼脂,ph 6.0-6.2;照度2000~2500lx,照度14h每天24小时;培养温度白天为25-30℃,晚上为15-20℃。

4成长和分化

4.1获得无菌材料选择一年生幼苗健康生长;对于无病虫害的亲本植株,当年春梢切尖,去叶,留叶柄,枝条切成2-3厘米段。消毒时,用10%的洗衣粉溶液浸泡15分钟,然后用自来水;冲洗30分钟。在无菌条件下,用75%乙醇溶液浸泡30S,用0.1%氯化汞溶液和吐温-20灭菌3、5、10、15分钟。0的杀菌效果。1%氯化汞溶液随着灭菌时间延长而增加。灭菌时间小于10分钟时,无菌疫苗获得率小于13.5%,灭菌15分钟后,无菌疫苗获得率为23.7%,外植体死亡率为33.3%。随着杀菌时间的延长,氯化汞对植物材料的毒性作用增强,0.1%氯化汞溶液的最佳杀菌时间为10-15 min。使用无菌水;洗涤3-5次后,接种在MS固体培养基上。

4.2芽的诱导将接种后20天的无菌苗转移到培养基(1)中,5-7天茎尖开始萌发,10天腋芽萌发,芽逐渐长大。连续培养20天后,茎段上的腋芽全部萌发成侧枝。侧枝生长正常,叶片深绿色,茎基部愈伤组织少,黄绿色。

4.3试管苗的增殖试管苗侧分支分为2-3个芽,接种在培养基(2)上。10天后,茎的叶芽萌发,30天内大量侧枝生长,产生大量孪生枝和三级枝。接种茎段形成5-8个侧枝的幼苗,平均增殖5.8倍。试管苗节间明显拉长,幼叶茎带红色,叶大茎粗,组织不完整,茎基部有大的愈伤组织。试管苗每30天继代培养一次,继代培养3-4次后出现玻璃化现象。

4.4壮苗培养增殖培养后的试管苗经3-4次继代培养后转移到培养基(3)中。40天后形成大量侧枝,平均长1.8cm,平均增殖3.1倍。基本没有未成熟的分枝或三级分枝。侧枝健康生长;d、组织饱满,叶片深绿色,基部愈伤组织小,黄绿色,无玻璃化现象。

4.5-根诱导。将生长旺盛且长度大于1.2厘米的枝条分开并转移到培养基(4)中。将照度提高到2500—3000lx,将光照时间延长到每天16小时。培养15天后,根原基开始形成,根原基形成后,幼苗可以变硬。生根调查在20-25天,生根率为73%,平均每苗1-2根。

4.6炼苗和移栽将生根的试管苗转移到带瓶培养温室中培养一周。当根长为0.5-1 OMB英寸时,打开瓶盖使幼苗变硬3-5天,取出生根的幼苗,清洗根培养基,并将其种植在幼苗穴盘中。以黑泥炭为基质,温度控制在20-25℃,湿度在85%-95%左右,20天后成活率可达73%以上。

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